Kasi ELISA daki yikughanaghanirapo vichi pa nkhani ya wovwiri na kusunga .

Nthowa zitatu zikusazgikirapo mu chipangizo cha ELISA: chiyelezgero, enzyme kukolerana, na chigaŵa. Para ŵasazgapo viyezgelero, vyakusazgapo vikwenera kuŵikika pasi pa mbuna ya ELISA kit mbale, kuti vileke kusazgikira ku chigaŵa cha pachanya cha mtenje wa mbuna, na kuŵa maso kuti vileke kuphaka, kuti vileke kugaya, kuti vileke kukhoma. Kanandi ŵakusazgapo na microsampler, kuyana na unandi wa mbuna ya mbale. Nozzle yakuyamwa yikwenera kusinthika nyengo yiliyose para chinthu chinyake chasazgikirapo kuti mtanda uleke kufipiskika. Chiŵiya cha pulasitiki chakuponyeka chingagwiliskirikaso ntchito kuti chisazgireko masampulo.

Vinthu ivi vikuwoneka mu wovwiri na kusunga chipangizo cha ELISA:

1, ŵakwenera kuŵikako mahara kuti ŵalekeske hemolysis yikuru. Hemoglobin ili na magulu gha hemo, agho ghali na ntchito yakuyana waka na peroxides. Ntheura, mu chipangizo cha ELISA na HRP nga ni chimanyikwiro cha enzyme, usange mtundu wa hemoglobin mu sampulo ya seramu uli pachanya, uzamusinthika waka ku chigaŵa chakukhora mu ndondomeko ya kubereka, ntheura kulongora mtundu na HRP substrate iyo yasazgikirapo pamanyuma.

2. Pa nyengo ya kusonkheska na kupatukana kwa seramu, ŵakwenera kuŵikapo mtima kuti ŵalekeske kufipiskika kwa mabakiteriya mwakukwana. Ma enzyme ghanyake agho ghakufumiskika na mabakiteriya ghangaŵa na nkhongono zakupambanapambana pa ma antigen, ma antibodies na mapulotini ghanyake para ghakukura. Kweniso, ma enzyme ghanyake gha mabakiteriya, nga ni - galactosidase gha Escherichia coli, ghazamutimbanizga kwambura kumanyikwa na nthowa yakusankhirapo mwakugwiliskira nchito enzyme yakuyana waka nga ni chimanyikwiro.

3. Usange chiyelezgero cha serum chikupatulika na ntchito ya aseptic, chingasungika pa 2 ~ 8℃kwa sabata yimoza. Usange likugwira ntchito na mabakiteriya, nchakukhumbikwa kuti liŵe lakuzizima. Vinthu ivi vikwenera kusungika pasi pa -70℃kwa nyengo yitali.

4. Kuŵikapo mtima kukwenera kulipirika ku kupeŵa kuzizimitsa kwakuwerezgawerezga -}faw chifukwa cha kutondeka kwa magesi kwa viyezgelero vya seramu ivyo vyasungika vyakuzizima. Kuzizimitsa kwakuwerezgawerezga {{{{{{im}}), nkhongono ya makina ya mtundu uwu yizamuparanya mapulotini na mamolekyu ghanyake mu chiyelezgero, ndipo ivi vizamupangiska kuti paŵe vinthu viheni vyautesi na chipangizo cha ELISA. Kuwonjezera apo, chisamaliro chikweneraso kulipirika ku kusakanizga kwa freeze -fayomu viyezgelero. Kugwedezeka kwa nkhaza kukwenera kuchitika, ndipo kusakanizga kukwenera kuwerezgeka na kusinthika.

5. Pa nkhani ya kusintha panji flocculent iyo yikupangika na kufipiskika kwa mabakiteriya pa nyengo ya kusungirako, supernatant yikwenera kutoleka kuti yimanyikwe pamanyuma pa kuŵika centrifugation.